Come Label proteasi substrato Prodotti

Le proteine ​​sono una componente di ogni cellula del corpo . Proteasi ( di cui anche gli enzimi proteolitici come o proteinasi ) sono enzimi digestivi la cui funzione è quella di demolire le proteine ​​. Oltre alla digestione , proteasi sono inoltre essenziali per la coagulazione del sangue , controllo metabolico e regolazione immunitaria . Durante il processo biochimico ( catalisi ) , substrati si legano al sito attivo dell'enzima e si trasformano in uno o più prodotti che vengono poi rilasciati dal sito . Questo processo può essere aumentata o inibita per aumentare o ridurre le reazioni nel corpo , a seconda del risultato desiderato . Prodotti substrato Etichettatura permette agli scienziati di misurare questa attività enzimatica . Etichettatura fluorescente è una tecnica usata per colorare particolari molecole , rendendoli più facili da monitorare. Cose che ti serviranno
target cocktail molecola fluorescente
kit etichettatura colorante
fluorescenza lettura strumento

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Come Label proteasi substrato Prodotti
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Scegli il tuo colorante fluorescente . Coloranti comuni includono rodamina e fluoresceina . Questi di solito possono essere acquistati presso i produttori .
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Eseguire la reazione e rimuovere fluoroforo inutilizzato da molecole bersaglio mediante cromatografia di esclusione dimensionale (un processo che separa le molecole in base alla loro dimensione) . Dye colonne di rimozione sono anche comunemente utilizzati . Questi sono spesso pubblicizzati con i kit di etichettatura .
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Rileva le molecole . Utilizzare uno strumento di lettura della fluorescenza , come un microscopio a fluorescenza . Luce di una specifica lunghezza d'onda passa attraverso la molecola ( indirettamente per alcune tecniche ) , illuminando il fluoroforo .
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Prendete le vostre misure . Poiché saggi misurare sia la quantità di substrato è stato consumato o la quantità di prodotto rilasciato per un periodo di tempo , importi enzimi possono essere misurati in moli ( grandezza fisica ) o in unità enzimatiche (attività ) .