Descrizione di un tubercolosi Gram

La tubercolosi è una malattia infettiva causata da Mycobacterium tuberculosis . La tubercolosi è una malattia respiratoria caratterizzata da formazioni di tubercoli , necrosi , ascessi , fibrosi e calcificazione nei polmoni . Si può anche infettare i reni , linfonodi , ossa , articolazioni e skin.Primary diagnostica di laboratorio di Mycobacterium tuberculosis comporta la colorazione di visualizzare i batteri sotto il microscopio . Il campione di scelta è espettorato o lavaggio broncoalveolare per identificare una infezione respiratoria o un campione di tessuto reale . Fisiologia

Mycobacterium tuberculosis è una forma di bastoncello ( bacilli ) , non mobili , non sporigeni , obbligare aerobica . Misurano micrometri 0.4x3 di lunghezza. Mycobacterium tuberculosis subisce fissione binaria ( divisione cellulare riproduttiva ) ogni 15-24 ore, che è lento rispetto ad altri batteri . A causa di questo , il micobatterio può richiedere fino a nove settimane a comparire su terreni di coltura .

Mycobacterium tuberculosis è sensibile ai raggi UV e al calore ( es. pastorizzazione ), ma resistenti ai disinfettanti chimici .

Gram Stain

Mycobacterium tuberculosis non può davvero essere classificato come gram positivi e gram negativi . La classificazione grammo si basa sulla quantità di peptidoglicano nella parete cellulare di un batterio . Un batterio gram positivo ha uno strato peptidoglicano spessore ( circa il 90 per cento ) , mentre un batterio gram negativo ha un sottile strato di peptidoglicano ( 5-20 per cento ) . I coloranti gram penetrano la parete cellulare e si legano con i componenti chimici nella parete cellulare . I batteri colorati appariranno viola o rosa sotto il microscopio .

Con Mycobacterium tuberculosis , la parete cellulare è composta da lipidi peptidoglicani ma anche complessi , che inibiscono grammo penetrazione del colorante . La parete cellulare resiste anche decolorazione da acido o alcool , in modo che il micobatterio sono definiti "acid -fast . " I lipidi della parete cellulare sono acido micolico , fattore cavo e cera - D . Se i batteri fossero macchiati , le cellule batteriche sarebbero appaiono debolmente gram -positivi o pallido con poco colore .

Per visualizzare i batteri , macchie particolari come la macchia Aumarine o la macchia Zhiel - Neelson devono essere eseguita .
auramina - rodamina

Il processo auramina - rodammina utilizza un colorante fluorescente giallo per visualizzarne Mycobacterium tuberculosis sotto un microscopio a fluorescenza . Il permanganato di potassio o arancio di acridina possono essere utilizzati come un contrasto . Sotto la lente , le cellule batteriche vengono visualizzati in verde.

La macchia Auramina - rodammina è più sensibile rispetto al Zhiel - Neelson e più conveniente . Macchia
Ziehl- Neelson

La colorazione Ziehl- Neelson originato da scienziati Franz Ziehl Neelsen e Friedrich . Esso utilizza fuschin carbol riscaldata , ad alta concentrazione di acido - alcool e di contrasto come malachite verde o blu di metilene . Sotto un microscopio a fluorescenza , le cellule batteriche appariranno rosa brillante.

Ziehl- Neelson è il gold standard per l'identificazione primaria di Mycobacterium tuberculosis e Mycobacterium leprae .
Agar

secondario alla microscopia identificazione, Mycobacterium tuberculosis deve essere coltivata su agar speciale cultura . Lowenstein - Jensen agar ha sostanze organiche complesse ( ad esempio uova, patate ) , sali , glicerolo e verde malachite ( inibisce altri batteri ) . Gli antibiotici possono essere aggiunti per inibire ulteriormente batteri contaminanti . Il campione viene posto su questo agar , ed i batteri crescono su tre nove settimane.

Una soluzione di coltura di nutrienti come albumina e biotina può essere utilizzato per sostenere la crescita anche la più piccola quantità di batteri bersaglio . Questo è noto come Middlebrook 7H9 ( o 7H12 ) medium .

Le colonie appaiono come piccoli , smerigliate , colonie marrone chiaro su entrambi.

Con la tecnologia avanzata , Mycobacterium tuberculosis può essere coltivato con un lettore automatico . Una soluzione liquida di Middlebrook 7H9 media e un composto indicatore fluorescente viene utilizzato per monitorare la crescita e segnalare l'infezione positivo o negativo .