Quando si contano i globuli rossi e i globuli bianchi si utilizza un emocitometro per campioni di sangue concentrato?

Quando si contano i globuli rossi (RBC) e i globuli bianchi (WBC), nell'emocitometro viene utilizzato un campione di sangue diluito e non un campione concentrato. La concentrazione del campione di sangue porterebbe a conteggi cellulari imprecisi. Ecco il processo di conteggio dei globuli rossi e dei globuli bianchi utilizzando un emocitometro:

Conteggio dei globuli rossi (RBC)

1. Preparazione del campione di sangue diluito:

- Diluire il campione di sangue in un fluido di diluizione specifico, solitamente con un rapporto di diluizione di 1:200 per i globuli rossi.

- Mescolare accuratamente il sangue diluito.

2. Caricamento dell'emocitometro:

- Posizionare un coprioggetto sull'emocitometro, assicurandosi che i bordi siano sigillati per creare una camera di conteggio.

- Introdurre una piccola quantità del campione di sangue diluito nell'emocitometro utilizzando un tubo capillare o una micropipetta.

3. Conteggio dei globuli rossi:

- Utilizzare un microscopio per visualizzare le cellule nella camera di conteggio.

- Concentrarsi sull'area grigliata dell'emocitometro, che è divisa in quadrati grandi e quadrati più piccoli.

- Contare il numero di globuli rossi all'interno dei quadrati specificati secondo le regole di conteggio specifiche (ad esempio, contando le celle che toccano le linee superiore e sinistra ed escludendo quelle che toccano le linee inferiore e destra).

4. Calcolo:

- Moltiplicare il numero di globuli rossi contati per il fattore di diluizione e la profondità della camera appropriati per ottenere la conta dei globuli rossi per unità di volume (solitamente cellule/μL).

Conteggio dei globuli bianchi (WBC)

1. Preparazione del campione di sangue diluito:

- Preparare un campione di sangue diluito separato, solitamente con un rapporto di diluizione di 1:20 per i globuli bianchi.

- Mescolare accuratamente il sangue diluito.

2. Caricamento dell'emocitometro:

- Ripetere la stessa procedura della conta dei globuli rossi, posizionando un vetrino coprioggetto sull'emocitometro e introducendo il campione di sangue diluito.

3. Conteggio dei globuli bianchi:

- Utilizzare un microscopio per visualizzare le cellule nella camera di conteggio.

- Concentrarsi sull'area grigliata dell'emocitometro e contare il numero di globuli bianchi all'interno dei quadrati specificati.

- Differenziare tra diversi tipi di globuli bianchi, se necessario (ad esempio, neutrofili, linfociti, monociti, ecc.).

4. Calcolo:

- Moltiplicare il numero di WBC contati per il fattore di diluizione e la profondità della camera appropriati per ottenere la conta dei WBC per unità di volume (solitamente cellule/μL).

È fondamentale seguire le istruzioni e le linee guida specifiche fornite dal produttore dell'emocitometro e del protocollo di laboratorio per garantire un conteggio accurato delle cellule.