Qual è la funzione di monitoraggio Dye in gel elettroforesi

? Elettroforesi su gel è un modo per separare frammenti di DNA in base alla loro dimensione . Si aggiunge colorante inseguimento per ciascun campione di DNA per aiutarvi a vedere il campione e per monitorare i progressi dei frammenti di DNA attraverso il gel . Importanza

Per separare frammenti di DNA , al fine di misurare le loro dimensioni o per isolare un frammento particolare , gli scienziati mettono DNA in un gel di agarosio immersi in una soluzione che viene caricata con una corrente elettrica . La corrente spinge i frammenti di DNA attraverso il gel , e perché il gel è poroso , più piccolo frammenti di DNA insinuano attraverso più rapidamente . Viaggiano lontano di frammenti più grandi nella stessa quantità di tempo .
Scopo

DNA è incolore quando è in soluzione in una provetta . Per rendere il campione più facile da vedere , sia nella provetta e nel gel , si aggiunge un colorante inseguimento colorato a campione . Il colorante non influenza il DNA a tutti.
Inseguimento

Il solito colorante inseguimento è blu di bromofenolo in una soluzione di glicerolo al 50 per cento . Bromofenolo colori blu il blu brillante campione in modo che sia facile da seguirne l'andamento attraverso il gel . Quando il colorante inseguimento ha percorso circa 3/4 della lunghezza del gel , è il momento di spegnere la corrente elettrica .
Densità

Il colorante inseguimento è denso causa della sua alta concentrazione di glicerolo . Questo rende i campioni di DNA affondano negli slot di caricamento del gel , piuttosto che galleggiare lontano nella soluzione sopra il gel che porta la corrente elettrica .
Dye migrazione

bromofenolo blu migra attraverso una soluzione di agarosio a circa la stessa velocità di un filamento di DNA contenente 300 paia di basi . Se si desidera tenere traccia dei progressi di grandi filamenti di DNA , è possibile utilizzare un colorante inseguimento con xilene cyanol , che migra a circa lo stesso tasso , come un filamento di DNA con 4.000 paia di basi .