Il test ELISA cambia un colore scuro come il nero o il grigio in trasparente?

Il test ELISA (saggio immunoassorbente legato all'enzima) non comporta un cambiamento di colore da scuro (nero o grigio) a trasparente. Tipicamente comporta invece un cambiamento di colore da incolore a colorato, indicando la presenza o l'assenza dell'analita target da rilevare.

In un test ELISA vengono seguiti una serie di passaggi che includono:

1. Rivestimento dei pozzetti della micropiastra con l'anticorpo di cattura specifico per l'analita target.

2. Aggiunta del campione o dello standard contenente l'analita.

3. Fasi di incubazione e lavaggio per consentire il legame dell'analita all'anticorpo di cattura.

4. Aggiunta di un anticorpo di rilevamento coniugato con un enzima (ad esempio, perossidasi di rafano o fosfatasi alcalina).

5. Fasi di incubazione e lavaggio per consentire il legame dell'anticorpo di rilevamento con l'analita catturato.

6. Aggiunta di un substrato specifico per l'enzima utilizzato nel coniugato dell'anticorpo di rilevamento.

7. Fasi di incubazione e arresto per consentire la reazione enzimatica e lo sviluppo del colore.

La fase finale si traduce in un cambiamento di colore, che può essere misurato spettrofotometricamente a una lunghezza d'onda specifica. Il cambiamento di colore avviene in genere da incolore a un colore visibile, come giallo, blu o rosso. L'intensità del colore è proporzionale alla quantità di analita presente nel campione.

Pertanto, in un test ELISA, il cambiamento di colore avviene da incolore a colorato, non da scuro (nero o grigio) a trasparente.