Come eseguire un test Allium Cepa

Cipolle ( Allium cepa ) sono utilizzati per valutare i rischi ambientali , consentendo radici in via di sviluppo vengano a contatto con le sostanze da testare . Dopo l'esposizione sufficiente , le radici sono tolti , macchiati e macerazione in modo che i cromosomi delle cellule può essere visto sotto un microscopio ottico . La tossicità risulta se vengono rilevate anomalie cromosomiche o anomalie divisione cellulare . Punte delle radici sono utilizzati perché le cellule ci sono in attiva crescita e dividendo , dando una buona occasione per vedere i cromosomi durante le diverse fasi della divisione cellulare . Cose che ti serviranno
Cipolle
coltello
Acqua
Bicchieri di vetro o altri contenitori per contenere liquidi e cipolle
test liquidi
lama di rasoio o bisturi
Fiale
Aceto - alcool fissativo
vetrini
copertura scivola acido cloridrico

in acciaio inox asta macerazione
carbolfucsina macchia
macchia Aceto - orceina
acido acetico
balsamo del Canada
microscopio ottico
attacco alla fotocamera per microscopio

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Impostazione del test
1

Rimuovere la pelle esterna secca del 12 cipolle . Raschiare il fondo della cipolla intorno alle piastre inferiori senza danneggiare la zona da cui emergeranno le radici .
2

Selezionare bicchieri che hanno una bocca larga abbastanza per sostenere la parte inferiore delle cipolle immersi nel test liquidi . Riempire i bicchieri con acqua distillata e immergere la cipolla nel becher in contatto con l'acqua . Proteggere i lati dei bicchieri con un foglio di alluminio per simulare il buio sotterraneo . Cambiare l'acqua ogni giorno .
3

Esaminare le basi di cipolla dopo due giorni . Roots dovrebbero hanno formato . Valutare la crescita delle radici e scartare le due cipolle con la crescita delle radici più deboli .
4

Impostare una seconda serie di cinque bicchieri contenenti ciascuno un campione del materiale da testare , come ad esempio le acque reflue o il deflusso industriali . Mettete cinque delle cipolle in questi bicchieri . Conservare gli altri cinque in acqua distillata come controlli di test . Lasciare le radici di crescere per altre 24 ore .
Preparazione dei Roots
5

Con un bisturi o lametta , raccolto 05:55 punte delle radici di ogni cipolla, la registrazione che erano i controlli e che erano soggetti di prova . Mantenere le radici dai singoli cipolle separati in piccoli flaconi etichettati .
6

consigli Fix radice subito in aceto- alcol in un rapporto 1:3 . Posizionare gli apici di una cipolla su un vetrino da microscopio e macerare in acido cloridrico 1N , che è lo stesso acido cloridrico 1 molare , a 60 gradi centigradi per tre minuti . Stain suggerimenti macerate con macchia carbolfucsina , una miscela di fenolo e fucsina basica che si lega agli elementi di pareti cellulari in modo che diventino più visibili al microscopio ottico .
7

Aggiungi il 2 per cento macchia aceto- orceina in 4 acido acetico cento . Questo colora i cromosomi . Rimescolare con la bacchetta macerazione . Applicare un vetrino , premendo verso il basso per schiacciare gli apici . O sigillare i bordi con asciugatura rapida smalto per unghie o montare in modo permanente i preparativi in Canada balsamo , resina dal balsamo abete miscelato sia con oli essenziali o xilene . Numero delle diapositive in modo che i risultati saranno registrati ma non risulta se ognuno è un soggetto di prova o un controllo .

Registrazione Risultati
8

Posizionare il vetrino da microscopio sul palco di un microscopio ottico . Esaminare il campo sotto ingrandimento inferiore, il passaggio a ingrandimenti elevati per esaminare i cromosomi .
9

Registrare le aberrazioni cromosomiche su un foglio di dati , informazioni di registrazione per il numero codificato per ogni cipolla. Includi cromosomi incompleto separati o rotti , micronuclei ( nuclei supplementari formate verso la fine della divisione cellulare che può contenere residui cromosomico ) , anelli cromosomiche e cromosomi appiccicoso e disturbati nelle diverse fasi della divisione cellulare . Fotografare ogni diapositiva .
10

Analizzare i dati utilizzando l'analisi statistica . Interpretare i risultati per valutare se la soluzione in esame è genotossico .