Alkaline Lysis Teoria

Scienziati usano lisi alcalina per estrarre DNA plasmidico dai batteri per esperimenti genetici . I plasmidi sono piccole molecole circolari di DNA contenenti un piccolo pezzo di codice genetico per lo studio. Perché alcalina Lysis

Il protocollo di lisi alcalina consiste in una serie di soluzioni aggiunte a un pellet batterico contenente DNA plasmidico . La maggiore alcalinità della soluzione induce le cellule a scoppio . Questo metodo di estrazione protegge il DNA plasmide mentre distrugge il DNA genomico e denaturazione delle proteine ​​cellulari a fornire scienziato con un campione relativamente puro .
SDS e NaOH

alcalina descrive l' due principali prodotti chimici utilizzati per provocare la lisi delle cellule singole . Sodio dodecil ( lauril ) solfato ( SDS ) è un detergente che destabilizzato la cella creando fori nella membrana cellulare . Idrossido di sodio ( NaOH) aggiunge ad abbattere la parete cellulare che causa la cellula a disintegrarsi e rilasciare il suo materiale genetico in soluzione.
Perché plasmidi DNA Sopravvive

un ulteriore proprietà di NaOH nel protocollo di lisi alcalina è di interrompere il legame idrogeno tra paia di basi del DNA . Questo denatura DNA genomico e DNA plasmidico di filamenti singoli . L'aggiunta di acetato di potassio alla soluzione neutralizza l'alcalinità e il piccolo DNA plasmidico è in grado di ri - natura e sciogliere nella soluzione . DNA genomico è troppo grande per ri - natura tutta la sua lunghezza . Essa e le proteine ​​denaturate precipitare durante la centrifugazione lasciando il DNA plasmide in soluzione .