Come determinare Anticorpi

Il test ELISA o enzima Test immunoenzimatico , è il test utilizzato commercialmente più comune per lo screening per la presenza di anticorpi . Questo test è utilizzato per lo screening per uso di droga , la gravidanza , l'AIDS e l'epatite , tra le altre condizioni . Questo test è popolare a causa della facilità di utilizzo e basso costo . Cose che ti serviranno
campione di siero
ELISA piastra
antigeni che coniugano l'anticorpo in fase di test per gli anticorpi
enzimi collegati o anticorpi secondari
enzyme linked cambiamento di colore dell'indicatore
asciugamani di carta
Occhiali

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1

Metti un antigene noto sulla superficie di diversi pozzi .

copertura ciascun pozzetto con 50 microlitri di liquido IgG . Non disturbare i pozzetti fino a 5 minuti sono passati . Lavare i pozzetti con acqua di rubinetto . Ripetere il processo di risciacquo cinque volte . Toccare il bene su un tovagliolo di carta per asciugare . Non pulire i pozzetti .
2

Aggiungere campioni di liquido corporeo , chiamati siero , alle piastre . Questi campioni di fluido corporeo può contenere la soluzione di coniugato e concorrente ai pozzetti . Questo si legherà se sono presenti gli anticorpi . I campioni di siero devono essere diluiti in modo che possano coniugare all'antigene applicata nella fase 1 .
3

Aggiungi una proteina , come la caseina , ai pozzetti . Questo consentirà di evitare altre proteine ​​che non vengono testati per aderisca al piatto .
4

Lavare la piastra risciacquando con acqua di rubinetto riversato delicatamente sopra i pozzetti . Quindi, toccare il lato della piastra su un tovagliolo di carta per rimuovere l'acqua in eccesso . Ripetere il lavaggio altre quattro volte . Non pulire i pozzetti . Aggiungere l'anticorpo che corrisponde a quello in fase di test per i pozzetti .
5

Lavare la piastra risciacquando con acqua di rubinetto versata delicatamente sopra i pozzetti . Quindi, toccare il lato della piastra su un tovagliolo di carta per rimuovere l'acqua in eccesso . Non pulire i pozzetti . Ripetere il lavaggio altre quattro volte . Questo processo di lavaggio consente di eliminare ogni antigene che non è legato dal pozzo . I pozzi ora contengono solo complessi antigene-anticorpo che vengono testati per . Lavare la piastra . Questo eliminerà eventuali anticorpi coniugati enzimi legati.
6

Aggiungi anticorpi secondari , detta anche anti- anticorpi , ai pozzetti . Questi si attaccano agli anticorpi di rilevamento . Gli anticorpi secondari sono coniugati per l'indicatore cambio colore , e per l'antigene che è stato aggiunto al pozzetto nel passaggio 1 .
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Lavare la piastra risciacquando con acqua di rubinetto versato delicatamente sopra i pozzetti . Quindi, toccare il lato della piastra su un tovagliolo di carta per rimuovere l'acqua in eccesso . Non pulire i pozzetti . Ripetere il processo di lavaggio quattro volte supplementari. Questo rimuoverà enzimi anticorpi collegati extra che non sono vincolati .
8

Applicare un legato indicatore di viraggio enzima alla piastra .

Questo farà sì che i pozzi che hanno gli anticorpi essendo testati per cambiare il colore .
9

Osservare i pozzetti della piastra per un cambiamento di colore , che indicherà la presenza di anticorpi nel campione di fluido corporeo .