Essenziali Metodi Citometria a flusso

comporta citometria a flusso del principio di focalizzazione idrodinamica , utilizzando una sorgente di luce di eccitazione come un laser , per misurare e analizzare le caratteristiche fisiche di singole particelle . Citometria a flusso è prevalentemente applicata all'analisi delle cellule , e le proprietà analizzati comprendono le dimensioni delle cellule , granularità e intensità di fluorescenza . Metodi di rilevazione essenziali utilizzati in flusso includono citometria luce, la luce laterale sparsi in avanti dispersi e fluorescenza . Citofluorimetro

un citofluorimetro è comprendere di fluidica , ottica e un sistema elettronico . Il sistema fluidico è responsabile del trasporto del flusso del campione al fascio laser per l'interrogazione . Il sistema ottico comprende laser e filtri di luce che illuminano campioni e segnali luminosi diretti ai rivelatori pertinenti . Questa luce rilevata viene convertita in segnali elettronici dal sistema elettronico , per l'interpretazione da parte del computer.
Luce Forward - Sparsi

luce diffratta sparsi in avanti viene rilevato circa 20 gradi rispetto all'asse del fascio laser da un fotodiodo chiamato canale in avanti - diffusa ( FSC ) . Luce avanti diffusa è direttamente proporzionale alla superficie delle particelle , ed è utilizzato come indicatore della dimensione cellulare e di distinguere tra cellule vive e morte . Grazie a queste caratteristiche , FSC viene applicato a immunofenotipizzazione come trigger di elaborazione del segnale.
Side luce diffusa

luce laterale dispersa si riferisce alla luce rifratta in qualsiasi interfaccia cellulare , che viene misurata a circa 90 gradi rispetto all'asse del fascio laser dal canale laterale scatter ( SSC ) , poi reindirizzato al rivelatore di riferimento da un divisore di fascio . Luce laterale diffusa è approssimativamente equivalente a granularità cella o complessità interna ed è utilizzato per determinare il contenuto granulare delle cellule . Laterali e la luce avanti sparsi vengono usati in combinazione per distinguere tra diversi tipi di cellule .
Fluorescenza

fluorescenza fornisce informazioni quantitative e qualitative sulle molecole intracellulari come le citochine e DNA , e la superficie cellulare recettori , utilizzando etichette fluorocromi e misurazione a diverse lunghezze d'onda . Ogni etichetta fluorocromo ha una lunghezza d'onda specifica squillò con cui la luce viene assorbita chiamato lo spettro di assorbimento . Funzioni di fluorescenza come un fotone di luce viene emessa da un elettrone eccitato a seguito di assorbimento della luce .