Procedure di estrazione del DNA

DNA è la ricetta per la vita; entro i suoi miliardi di codici gettare le basi per gli organismi . Lo studio e l'analisi del DNA - in tutto, dalla genealogia di indagini penali - è diventato molto comune. Per esaminare DNA , però, deve prima essere estratto da un campione . Che si tratti di una ciocca di capelli o un po ' di sangue , il DNA può essere trovato in quasi tutto ciò che costituisce un organismo e le sue procedure di estrazione sono stati perfezionati nel corso dei decenni .
Cell Lysis

Lysis è l'azione con cui le cellule sono letteralmente rotti , causando il loro contenuto di fuoriuscita per l'analisi. Le cellule che contengono il campione di DNA da estrarre devono essere aperti , permettendo così di accedere al lisato , o il liquido all'interno. Ciò si ottiene mediante diversi metodi , il più comune dei quali è sonicating . Sonicating è il processo mediante il quale il suono viene applicata alle celle , agitando quindi li e rompendo loro reazioni intermolecolari condensato . Altri metodi per indurre la lisi includono l'introduzione di un virus , che rompe aperto dall'interno; enzimi che mangiano via alla sua superficie; e osmosi , che consiste nel posizionare le cellule in acqua , permettendo al fluido all'interno di essi per rendere la sua via verso l'esterno , dove può essere estratto .
membrana rimozione

Successivamente, i lipidi intorno membrana della cellula deve essere rimosso . I lipidi sono tipi di grassi , cere , monogliceridi , fosfolipidi e altre sostanze molecolari presenti in natura utilizzati come componenti strutturali alle membrane cellulari , dando loro una certa rigidità . Questi vengono rimossi lavando lisato delle cellule in una soluzione detergente , di solito una forma di acido cromico .
Protein rimozione

Dopo i lipidi sono stati rimossi con successo dalla lisato , ora è importante rimuovere eventuali proteine ​​rimanenti. Questo si realizza attraverso l'aggiunta di ciò che è noto come una proteasi . Un proteasi è un enzima speciale progettato per abbattere le proteine ​​fornite . Questa azione si chiama proteolisi , mentre la proteasi provoca idrolisi ( rottura verso il basso ) dei legami che tengono insieme gli amminoacidi . Gli aminoacidi compongono le proteine ​​, e senza la loro configurazione , la proteina si rompe.
Precipitante

E ' finalmente il momento di vedere il DNA puro . Questo può essere fatto immergendo il lisato in alcol ghiacciata , di solito etanolo . Poiché il DNA è insolubile in alcool , si aggregano insieme . Quando la miscela viene agitata con un cucchiaio di metallo , il DNA visibilmente avvolgere attorno al metallo , simile cotone bianco . Questo è noto come precipitazione , con il DNA noto come precipitato di DNA .
Isopropanolo

Insieme con etanolo , isopropanolo inoltre è usato occasionalmente non estrarre il DNA precipitato . Sul lato positivo , è più efficiente di etanolo , ottenendo una maggiore concentrazione di DNA quando viene utilizzato. Tuttavia, è anche molto meno volatile e richiede più tempo per asciugare . Si può inoltre osservare che il DNA non può aderire così al cucchiaio o del tubo in utilizzando isopropanolo .