Protocollo di DAPI Stain

DAPI sta per la chimica 4' - 6 - Diamidino - 2 - phenylindole , e serve a colorare DNA a doppio filamento . Il composto forma complessi fluorescenti blu con nuclei di cellule e così è usato comunemente per evidenziare la struttura delle cellule . Il tipo e la densità di colorazione anche in grado di identificare le cellule morte o morenti . Preparazione DAPI Soluzione

La soluzione DAPI prima deve essere diluita in una soluzione di lavoro . Ad esempio, 10 mg del prodotto Invitrogen DAPI deve essere miscelato con 2 mL di acqua deionizzata , e poi ulteriormente diluita a concentrazione 300 nano - molare ( indicazioni saranno presenti sul prodotto ) con tampone fosfato salino ( PBS ) .

preparazione del campione

Fissare il campione come appropriati per il tipo di campione da testare su un vetrino . Aggiungere 300 microlitri della soluzione di lavoro DAPI al campione e incubare per uno a cinque minuti . Sciacquare il vetrino con PBS .
Analizzare

Utilizzare un microscopio a fluorescenza a guardare il campione montato -slide . I nuclei DAPI - colorati possono essere identificati da una fluorescenza blu .