Salute e malattia
misura di espressione della proteina in grado di fornire indizi circa l'attività dei geni nel vostro corpo , perché le proteine funzionano come il catalizzatore finale delle attività cellulari. Tuttavia, secondo un articolo nel numero di marzo 2010 della " LabMedicine ", patologi e biologi devono ancora accordarsi sulla microscopia in campo chiaro o microscopia a fluorescenza , come il metodo più adatto per misurare l'espressione della proteina . Scansione brightfield Whole -slide non è solo facile da usare e fornisce stabilità cromogeno , ma può proteggere vetrini più . Cose che ti serviranno
Posizionare il tessuto cellulare su un vetrino e aggiungere un anticorpo secondario biotinilato , seguita da una perossidasi streptavidina - rafano e attendere per due minuti .
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versare quattro gocce di 3,3 ' - diaminobenzidina sul campione e attendere due minuti per la macchia marrone di diffondere tutto sul campione .
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Posizionare una sezione istologica della macchiato campione su una piattaforma motorizzata in una stanza ben illuminata . Regolare accuratamente la telecamera line- scansione a colori a 20X o 40X di ingrandimento e la scansione del campione. Allineare le strisce dell'immagine e comprimere l'immagine digitale in un formato file leggibile .
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stampare l' immagine digitale per l'analisi manuale o alimentare l' immagine nel software per l'analisi tecnica assistita . Osservare lo schema delle macchie come presentato nell'immagine . Analizzare attentamente espressione proteica basata sui modelli delle macchie sul provino .
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Calcolare l'espressione della proteina in cellule tumorali e stroma esaminando la concentrazione di proteina espressa sul tessuto cellulare .
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Utilizzare i modelli di colore per quantificare l' espressione della proteina in una scala da 0 a 3 + . Utilizzare il punteggio per calcolare HER -score o il punteggio Allred .
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