Anticorpo Procedure di etichettatura

procedure di etichettatura anticorpo sono tecniche utilizzate nelle scienze biologiche per rilevare la presenza di molecole specifiche . Queste procedure utilizzano la relazione tra un antigene ed anticorpo . Gli antigeni possono essere qualsiasi molecola che il sistema immunitario riconosce . Un anticorpo è una proteina a forma di Y che riconosce specificamente un singolo antigene . I biologi usa il rapporto di legame tra un anticorpo e antigene per determinare la posizione di una molecola specifica in un campione . ELISA

ELISA o enzima Test immunoenzimatico , è una tecnica di laboratorio biologico utilizzato per rilevare la presenza di un antigene o anticorpo . E 'spesso usato nella diagnosi medica per determinare se un paziente è stato esposto a un particolare tipo di infezione .

Per eseguire un test ELISA , il — campione contenente l'antigene di interesse — è ancorato ad un supporto solido in un piatto . Una soluzione con l'anticorpo complementare viene aggiunto al piatto , e l'anticorpo si lega all'antigene . Anticorpo in eccesso viene poi lavato via , lasciando solo le antigene-anticorpo legato coppie nel piatto . Questi possono essere visualizzati tramite l'aggiunta di una molecola fluorescente che si lega all'anticorpo ed emette un segnale visivo , che può essere quantificato . In questo modo , la presenza e la quantità di antigene di interesse può essere determinato indirettamente .
Western Blot

un Western blot è un diverso tipo di tecnica utilizzata per rilevare una proteina specifica in un campione e determinare la dimensione . In primo luogo, le proteine ​​del campione sono distribuite dal formato su un gel mediante elettroforesi su gel . A questo punto , le proteine ​​non sono visibili ad occhio nudo . Gli scienziati poi trasferire le proteine ​​di membrana e aggiungere una soluzione contenente l'anticorpo per l'antigene di interesse . Dopo lavaggio per allontanare l'eccesso di soluzione , l'anticorpo è legato all'antigene sulla membrana .

Aggiunta di un anticorpo secondario provoca l'originale , o primaria , anticorpo emettere luce . Quantificare la quantità di luce emessa permette ai ricercatori di determinare la presenza dell'antigene , le sue dimensioni rispetto ad altre proteine ​​e la sua concentrazione relativa.
Immunoistochimica

Immunohistochemistry è una tecnica che permette ai ricercatori di visualizzare la posizione di una proteina in un campione di tessuto . Fettine di un campione sono preparati e un anticorpo primario , che attribuisce l'antigene di interesse , viene aggiunto . Soluzione in eccesso viene lavato via prima che i ricercatori aggiungono un anticorpo secondario . Questo anticorpo si lega alla coppia anticorpo - antigene primario ed emette luce , per indicare la posizione del l'antigene di interesse .

Scienziati utilizzano un microscopio per visualizzare dove l'antigene è nella cella . Diverse anticorpi diversi , ognuno specifico per una proteina particolare , possono essere utilizzati per determinare la posizione relativa di alcune molecole in una cella . Se questo è l'obiettivo , anticorpi secondari di diverso colore vengono utilizzati per distinguere tra le diverse molecole di interesse .
Citometria a flusso

Fluorescence -activated cell — ordinamento o FACS — è un tipo di citometria a flusso utilizzato per separare diversi tipi di cellule in una soluzione . Ogni diverso tipo di cellula è " etichettato " con un anticorpo specifico per il tipo cellulare . Ciascuno di questi anticorpi emette un colore diverso della luce . Una macchina agita la soluzione per ridurlo in singole gocce e utilizza un sensore per rilevare il colore di ciascuna goccia . La macchina ordina le cellule colore emesso , dividendoli in base al tipo di proteine ​​che contengono. Metodologia FACS permette ai ricercatori di ordinare e quantificare le cellule di interesse alle loro domande di ricerca .
Immuno - Electron Microscopy

microscopia elettronica normale permette agli scienziati di esaminare la struttura di una cellula ingrandita fino a 1 milione di volte . Microscopia immuno - elettrone utilizza le proprietà di legame anticorpo - antigene di visualizzare particolari proteine ​​in sezioni di tessuto molto sottili . In primo luogo , anticorpi con particelle d'oro attaccate sono autorizzati a legarsi all'antigene di interesse . Un microscopio elettronico quindi visualizza le particelle d'oro , dando ai ricercatori un'immagine dove la proteina è localizzata nella cella .

Sebbene microscopia immuno - elettrone è semplice in teoria , è tecnicamente difficile e molto costoso da impiegare , limitando la sua popolarità di utilizzo in numerosi programmi di ricerca biologica .