Protocolli genetiche

DNA genomico fornisce il modello per le cellule di organizzarsi in organismi viventi . DNA contiene quattro ripetenti basi azotate chiamate adenina , guanina , citosina e timina . I ricercatori hanno determinato correttamente l'intera sequenza di basi , il genoma , per molti organismi complessi compresi gli esseri umani . Ci sono molte ragioni importanti per sequenziare un genoma . Genetica medica si occupa con la scoperta di anomalie genetiche che causano malattie come il diabete , il morbo di Alzheimer e il cancro . Genetisti evolutivi confrontare i genomi di specie affini per sviluppare tassonomia precisa . Protocolli genetici di base nella ricerca sono gli stessi , non importa a scopo di ricerca . Isolare il DNA da cellule

ricerca genetica richiede l'estrazione di un campione di DNA puro dalle cellule . Un protocollo di base inizia interrompendo e rimuovendo le pareti cellulari delle piante di protezione o le membrane delle cellule animali con un enzima chiamato lisozima . Componenti cellulari non genetici in forma di precipitati vengono rimossi dal rapido filatura con una centrifuga mentre DNA rimane in soluzione . DNA viene quindi precipitato in presenza di sale acetato di sodio con etanolo . Precipitati centrifugazione finali e pellets materiale genetico puro scopo di ricerca .
Polymerase Chain Reaction

ricerca genetica richiede copie sufficiente di regioni del DNA specificati. La reazione a catena della polimerasi o PCR , è un metodo per produrre in modo esponenziale copie di DNA . Il protocollo richiede DNA purificato , Taq polimerasi , basi chiamati deossinucleotidi e piccoli filamenti di DNA per innescare l'area designata . La miscela di reazione viene posta in un termociclatore , uno strumento capace di rapidi cambiamenti di temperatura . Riscaldamento della miscela a 95 gradi Celsius separa DNA a doppio filamento , quindi raffreddata a 48 gradi in modo primer possono sedersi , o ricottura , alle basi corrispondenti . La temperatura è aumentata a 72 gradi quando Taq polimerasi assembla deossinucleotidi , chiamato , in una nuova copia del DNA .
DNA genetica Sequencing
Sequencing dati appare come colorato bande che designano basi del DNA .

sequenziamento automatizzato viene utilizzato per determinare la sequenza esatta di base e confrontarlo con il DNA normale anormale. Il protocollo aggiunge dideossinucleotidi fluorescenti marcati , o ddNTP , di reazioni normali PCR , che si ferma a caso l'estensione di frammenti di DNA . I prodotti sono frammenti di DNA differenti da una singola base . Ogni tipo di base ha un colore diverso . I prodotti finali sono caricate su un sequenziatore automatico , uno strumento destinato a separare frammenti da dimensioni su un polimero utilizzando corrente elettrica . Quando i frammenti raggiungono il punto finale del polimero , una fotocamera digitale registra il colore di base e invia i dati al computer per l'analisi .
Genotipizzazione e fingerprinting del DNA
fingerprinting del DNA viene utilizzato per identificare umana rimane .

genotipizzazione è un metodo che confronta piccoli segmenti di un genoma da un organismo all'altro . L' obiettivo è rilevare piccole differenze nella dimensione del frammento PCR derivante da variazioni normali o accidentali basi nel DNA. Il design protocollo inizia con PCR di base utilizzando un innesco fluorescente marcato per la rilevazione su sequenziatori automatici . I prodotti etichettati sono separati da dimensioni e registrati da fotocamera digitale a un computer per l'analisi . Protocolli di genotipizzazione sono progettati per l'identificazione forense , DNA fingerprinting e la paternità o identificazione di anomalie genetiche che provocano la malattia .