Componenti della colorazione di Gram

La colorazione di Gram, che è stato sviluppato da un microbiologo olandese nel 1884, è un test medico utilizzato nel differenziare tra due diverse condizioni polmonari. Il test esamina le cellule nei polmoni e determina quale tipo di batteri è presente sulla base delle reazioni a determinati componenti iniettati nel tessuto. Violet Dye

Il primo componente aggiunto a un laboratorio di colorazione di Gram è la colorazione primaria. Questa macchia è tipicamente un certo tipo di colore violetto, come il cristallo, metile o Genetian viola. Lo scopo di questo colorante è di cambiare il colore delle cellule batteriche. Tuttavia, questo componente non viene utilizzato da solo. Dopo questo componente viene aggiunto alle cellule, il secondo componente deve essere aggiunto prima di fare osservazioni preliminari. Senza il secondo componente, il colorante è meno probabile colorare le cellule.
Iodio

Contemporaneamente il colorante viene aggiunta alle cellule, il tecnico di laboratorio anche aggiunge iodio per il mix. Lo iodio lavora con il colorante violetto per creare una tenuta maggiore sulle cellule che mantengono il colore. In questa fase della prova, tutte le celle acquisirà il colore viola-marrone del mix violetto-iodio. A questo punto, c'è poco differenziazione tra un test che è positivo rispetto a quello che è negativo.
Alcool etilico o acetone

Dopo che le cellule sono state tinto con la combinazione di colorante violetto e iodio, alcool etyhl, acetone o una combinazione dei due sono aggiunti per decolorare le celle. In cellule che sono negativi, la soluzione decolorazione dissolve lo strato grasso esterno delle cellule. Perché solo lo strato esterno di tutte le celle assorbe il colorante, le cellule negative vengono lavate libera del colore con questa soluzione. Tuttavia, le cellule Gram positivi mantengono il loro colore viola-marrone perché la soluzione disidrata le cellule, chiudendo i pori attraverso i quali il colorante può sfuggire.
Controcolorare

diversi laboratori utilizzare diversi tipi di controcolorante come ultimo componente di un test di colorazione di Gram. Alcuni laboratori utilizzano fucsina, mentre altri utilizzano invece safranina. Tuttavia, la fucsina crea una più scura, più facilmente visibile del colore ed è spesso preferito. Lo scopo di questa seconda colorante è trasformare eventuali cellule negative a colore rosa invece della porpora-marrone dal colorante violetto e combinazione iodio. Questo aiuta il tecnico di laboratorio di vedere chiaramente le differenze tra i due tipi di cellule. Una volta che il tecnico di laboratorio amministra il colorante di contrasto, si può distinguere tra le due cellule, così come vedere la dimensione e la forma chiaramente.