MBP Purificazione Protocolli

MBP o maltosio proteina di legame si trova nei batteri Escherichia coli, che fa parte della flora intestinale degli esseri umani e animali. La purificazione di MBP comporta una serie di procedure destinati a separare i costituenti proteici. In biologia molecolare, MBP purificazione è un processo vitale per lo studio della struttura e della funzione di questa proteina. Protocolli di purificazione MBP MBP sono fuse proteine ​​purificazione, di piccola scala MBP-fusion e maltosio legame proteina di fusione tag purificazione. MBP Fused Proteine ​​Purificazione

Durante questo protocollo, i tecnici lavano 20 ml della resina polimerica con amilosio atris soluzione a pH 7,4, cloruro di sodio, mercaptoetanolo (ME) e acido etilendiamminotetraacetico (EDTA), secondo protocolli online. Campioni cellulari sono aggiunti, centrifugati e analizzati su gel elettroforesi. I campioni sono analizzati in un cromatografo, dove i tecnici eluato o osservare costituenti della soluzione durante il passaggio attraverso la colonna cromatografica.
Small Scale MBP-Fusion Protein Purification

Secondo l'Università Ebraica di Gerusalemme, i biologi usano il isopropilico BD-1-thiogalactopyranoside (IPTG), coltura cellulare di spin reagente per 10 min a 8000 giri al minuto a 39,2 gradi Fahrenheit. Più tardi, rimuovono liquido surnatante e si mescolano tampone PBS freddo al campione, che è diviso in diversi tubi e centrifugati di nuovo. I campioni vengono quindi mantenuti a -112 gradi Fahrenheit per l'analisi posteriore. | Photos.com Maltose Binding Protein Fusion Tag depurazione

tag Affinità sono molecole geneticamente modificate impiegate nel campo della biologia molecolare per rilevare e purificare le proteine. Questo protocollo è un insieme complesso di procedure diviso in tre fasi, che includono la costruzione della proteina marker poliistidina (HisMBP), un esperimento pilota per valutare la solubilità della proteina, e la purificazione su larga scala di molecole MBP, secondo natura Protocolli . Oltre ai campioni di E.coli, tecnici utilizzare ampicillina, kanamicina, IPTG, anhydrotetracycline, glucosio monoidrato, tampone di lisi delle cellule, la DNA polimerasi, PCR primer, Tris-acetato-EDTA e di bromuro di etidio.