Che cos'è un microscopio confocale utilizzato per?

Ordinaria microscopia ottica non può essere usato per osservare un tessuto tridimensionale senza sezionare fisicamente il campione. Microscopia confocale a scansione, tuttavia, è un metodo alternativo di osservazione che fornisce un modo più diretto di vedere l'architettura tridimensionale di un tutto, provino non sezionato. Metodi di imaging elettronico consentono all'utente di concentrarsi su uno stesso piano in un campione di spessore, respingendo la luce che viene da sopra e sotto il piano di messa a fuoco. Perché Confocal Microscopy?

Microscopio confocale a scansione è utilizzato dai ricercatori in scienze biologiche e altre industrie di ottenere un'immagine dell'architettura tridimensionale di un campione, ad esempio una cellula o tessuto. Inoltre, la procedura viene utilizzata per osservare la struttura microscopica di un campione che per qualche motivo non possono essere tagliati in sezioni anticipo. Anche se queste sfide possono essere soddisfatte utilizzando un programma di elaborazione complesso basato su computer immagine, questo metodo è lento e richiede una grande quantità di potenza di calcolo.
Microscopia confocale vs standard Luce microscopia

Se un campione di spessore è vista con un microscopio ottico convenzionale, l'immagine ottenuta puntando su qualsiasi piano specifico è aggravata da letture, out-of-focus sfocate che provengono dalle parti del campione sdraiato sopra e sotto il piano di messa a fuoco. Per microscopia luce ordinaria funzioni bene, un campione deve essere tagliato in sezioni sottili da analizzare, e lo spessore della sezione è inversamente proporzionale alla nitidezza dell'immagine. Tuttavia, le informazioni eventualmente preziose circa la terza dimensione si perde quando un campione è sezionato e, come detto, alcuni campioni non possono essere sezionati facilmente a tutti.
Come funziona

Il microscopio confocale a scansione si concentra su di un piano specifico in un campione di spessore, respingendo la luce che proviene da regioni out-of-focus di sopra e al di sotto di quel piano. Ciò comporta una "sezione ottica," pulito e da una sequenza di queste sezioni prese a diverse profondità, un programma di computer può ricostruire una immagine tridimensionale. Questa strategia è abbastanza simile a quello che uno scanner CAT fa per radiologi indagano un intero corpo umano, in quanto entrambi i metodi presentano vedute pulite sezionali di interno di una struttura intatta
Come funziona:. L'Dettagli

Il dispositivo è generalmente utilizzato con ottica fluorescenza, e in ogni istante sistema ottico della macchina concentra i riflettori su un singolo punto ad una certa profondità nel campione. È necessaria una fonte estremamente luminoso di illuminazione puntuale, e questo è di solito fornito da un laser la cui luce viene fatto passare attraverso un foro stenopeico. Un rivelatore dotato di un'apertura pinhole raccoglie la fluorescenza emessa dal campione illuminata. Solo la luce del punto di messa a fuoco specifico entra nel rivelatore e il dispositivo esclude luce proveniente da aree al di fuori del piano di messa a fuoco.
Usi specifici

La scansione confocale microscopio è spesso usato per risolvere la struttura di vari oggetti tridimensionali complesse, come le reti di fibre del citoscheletro nel citoplasma delle cellule, e le modalità di cromosomi e geni nel nucleo di una cellula durante punti diversi del ciclo di divisione cellulare. Granuli di polline, per esempio, hanno una complessa parete cellulare scolpito, che può essere visto solo in modo chiaro usando la microscopia confocale. L'industria elettronica utilizza anche questa macchina e la metodologia per ispezionare semiconduttori.