Plaquè Assay

Un saggio è una tecnica utilizzata per isolare e purificare virus e per determinare titoli virali (la più bassa concentrazione di virus che provoca l'infezione). Un saggio di placca, originariamente chiamato un test virologico, è stato sviluppato per misurare e contare l'infettività dei batteriofagi. Secondo Biologia-Online.org, è stato in seguito applicato anche per contare i virus dei mammiferi. L'fatti

Una targa è un confluente, cultura monostrato di cellule. Si forma come risultato di un'infezione di una delle celle di una singola particella virus, secondo Biologia-Online.org. Quando la cellula è infettata, il virus si replica e alla fine uccide la cellula. Inoltre, le particelle virali di recente replicato diffuse, infettare e uccidere le cellule vicine.
Funzione

In un saggio di placca, la cultura è prima trattato con un particolare colorante. Questo macchie solo morire (live) cellule vitali, secondo Biologia-Online.org. Come risultato, le cellule morte appaiono non colorate nella cultura, contro il fondo tinta. Attualmente, il saggio di placca è utilizzata per individuare le cellule che producono anticorpi che distruggono i globuli rossi da emolisi.
Caratteristiche

eritrociti sono le cellule (chiamati anche globuli rossi ) che contiene ossigeno dell'emoglobina e di trasporto e di anidride carbonica nel sangue, dai polmoni e nei tessuti. L'emolisi si verifica quando gli eritrociti rompono emoglobina aperto e rilascio, secondo Biologia-Online.org. Come risultato, nel saggio di placca, la base è chiara la placca e indica che i globuli rossi sono stati emolizzati dagli anticorpi.
Metodo Parte I

Ten diluizioni-fold di un virus magazzino sono preparati prima di eseguire un saggio di placca e aliquiots 0,1 ml sono messi su per i monostrati cellulari. Questa miscela è incubata per un periodo di tempo in modo che il virus abbia il tempo di attaccare le cellule. Inoltre, i monostrati sono coperti da un mezzo nutriente contenente una sostanza (di solito agar), secondo le "rilevare Virus: Un saggio di placca" di Vincent Racaniello. Il terreno nutriente forma un gel e dopo la coltura viene incubata, le cellule infette originali rilasciare progenie virale. Il gel limitare la diffusione del virus alle cellule circostanti, e come risultato, la particella infettiva produce una zona circolare chiamato placca. Con il tempo, la placca cresce a una dimensione visibile ad occhio nudo e coloranti sono utilizzati per migliorare la visione.
Metodo Parte II

Il titolo virale è calcolato in unità formanti placca, chiamati PFU, per millilitro. Essi sono contati e, per errore minimizzato, piatti unici che contengono tra 10 e 100 placche sono contati. Inoltre, secondo la "Rilevazione Virus: Un saggio di placca", per ogni 100 placche contati lo stesso titolo verrà variare di più o meno il 10 per cento. Quindi l'errore stimato di un saggio di placca è di circa il 10 per cento, se eseguita correttamente.