Agar metodi di diluizione

Nei metodi di diluizione agar , le soluzioni contenenti un determinato numero di microbi sono disposti su una piastra di agar ricco di sostanze nutritive e inoculati con varie concentrazioni di un agente antimicrobico . La piastra è incubata per circa 24 ore ed è valutata la torbidità , sedimenti crescita o la quantità di colonie microbiche presenti . I microbi sono classificati come sensibile, intermedio o resistente alla attività antimicrobica . Minima concentrazione inibente

Lo scopo di diluizione agar è quello di determinare la minima concentrazione di agenti antimicrobici , come antibiotici, disinfettanti o conservanti , necessaria per distruggere o prevenire la crescita microbica , che si chiama la concentrazione minima inibente ( MIC ) . MIC è misurata in milligrammi per litro , i valori ottenuti sono usati per misurare l'efficacia degli agenti antimicrobici - . , Ad esempio , la sorveglianza della resistenza agli antibiotici
Colony metodo di sospensione

Questo metodo comporta il trasferimento di un piccolo campione di colonie microbiche selezionate a un tubo di vetro contenente soluzione salina . Il tubo viene agitato energicamente e lasciato riposare . La torbidità viene misurata come un segno di crescita microbica confrontando il contenuto del tubo con uno standard di laboratorio come standard McFarland . Il confronto è più fatta contro uno sfondo bianco in una stanza con illuminazione adeguata . Il metodo di sospensione colonia richiede circa cinque minuti per campione.
Metodo

Crescita Nel metodo crescita, colonie microbiche selezionate vengono posti in una provetta contenente una sostanza nutritiva - terreno ricco . Il tubo viene quindi incubato tra i 95 ei 99 gradi F che vengono scosse allo stesso tempo . Questo processo richiede circa due a sei ore , a seconda del tasso di crescita del microrganismo . Al termine , torbidità viene valutata utilizzando lo stesso standard come il metodo di sospensione colonia.
Metodo della Crescita usando colture Overnight

colonie Microbe in mezzi ricchi di nutrienti vengono incubate per una notte . Successivamente alla incubazione , la densità ottica di ciascun campione viene misurata a 600 nm . Il campione viene quindi diluita con terreno nutritivo ad un rapporto di 1 a 100 e suddiviso in cinque diluizioni 1: 10 . Quattro delle nuove diluizioni sono sparsi su una piastra di agar e incubati durante la notte . Il giorno seguente la quantità di colonie formate viene contato e unità formanti colonia per millilitro viene calcolato .