Come analizzare Citometria a flusso di dati

citometria a flusso è il processo di analisi e il conteggio delle cellule e particelle utilizzando la teoria della dispersione della luce e la luce di eccitazione . Le cellule vengono forzate attraverso una guaina uno alla volta e passano attraverso il fascio di un laser . Il laser eccita le sostanze chimiche all'interno delle cellule . Diversi tipi di cellule emettono diversi tipi di luce . Rivelatori ottici o lenti a raccogliere e misurare la luce , trasferire la luce in un flusso di dati . Analizzando i dati , i tecnici riescono a capire la distribuzione delle cellule e aiutare i ricercatori del medico e prendere decisioni in materia di trattamento . Istruzioni
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Impostare i parametri del citometro . Ogni citometro ha un componente elettronico che accetta la luce emessa dalle cellule e converte la quantità e qualità della luce di dati accessibili . Poiché esistono diversi tipi di cellule , vi è una grande quantità di dati creati . Impostazione dei parametri dei dati necessari rallenta il flusso di informazioni a un livello gestibile . Alcune opzioni includono l'impostazione del livello di tensione , la regolazione dei parametri di impulsi laser o impostando la soglia di luce .
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Scegli i filtri su ogni lente ottica . Filtri che tagliano fuori specifica larghezza di banda per ogni obiettivo permettono citometro a riconoscere le diverse proprietà chimiche di ogni cella . Esso consente inoltre al citometro a riconoscere se la luce viene riflessa davanti a sé, come un forward scatter ( FS) o se si riflette con un angolo di 90 gradi in un side scatter ( SS. )
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Scegli l'acquisizione logaritmica o lineare . Acquisizione lineare sono i dati prima che viene generato dal citometro . Essa mostra il tipo di cellula , o la composizione chimica delle cellule che fluiscono attraverso il fascio laser . La funzione logaritmica va un passo oltre . Esso utilizza una funzione matematica per proiettare celle aggiuntive che potrebbero non essere rilevabile con il citometro . Per esempio , le cellule possono mostrare un composto chimico che è un sottoprodotto di una infezione virale . Anche se il virus può essere troppo piccolo per essere rilevato dal flusso di luce , la funzione logaritmica si ipotizza la presenza del virus basato sulla composizione chimica delle cellule .
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Selezionare uno o due parametri istogrammi . Questi sono i tipi di grafici utilizzati per visualizzare i dati raccolti dal citometro . Un istogramma è un parametro appropriato se i dati sono tutti tracciati su un asse " positivo " , nel senso che tutta la luce viene riflessa e misurata . Un modo semplice per pensare questo è immaginare un grafico a barre , ai livelli di sinistra e inferiore del telaio . I dati vengono inseriti tra questi due parametri . Ma per quelle cellule che assorbono differenti quantità di luce , viene utilizzato un parametro due istogramma . Questo permette ai dati di essere tracciati sia su un asse positivo e negativo .