Come confrontare DNA Gel elettroforesi Metodi

Gel elettroforesi è una tecnica standard separa DNA , RNA o proteina attraverso un gel utilizzando una corrente elettrica . Esso utilizza la carica elettrica delle molecole di separarli in un gel utilizzando una corrente elettrica . Agarose

agarosio gel è il metodo più comune per la visualizzazione del DNA . Diverse percentuali di agarosio possono essere utilizzati a seconda delle dimensioni del DNA da visualizzare . Una bassa percentuale di agarosio , come 0,7 per cento , ha la risoluzione per visualizzare grandi frammenti di DNA . Una percentuale più alta , ad esempio 2 per cento , viene spesso utilizzato per visualizzare piccoli frammenti di DNA . Per visualizzare DNA , bromuro di etidio è spesso usato come intercala con il DNA e reagisce alla luce UV .

Poliacrilammide

gel di poliacrilammide vengono utilizzati per frammenti di DNA separati piccoli come 10 paia di basi fino a 1 kb . Questi gel hanno un piccolo intervallo di separazione , ma con una risoluzione elevata . Tuttavia, sono anche più complicato da preparare. È anche possibile caricare grandi quantità di DNA senza compromettere la risoluzione . Come con agarosio , bromuro di etidio è spesso usato per visualizzare i frammenti di DNA , ma poliacrilammide può placare la fluorescenza , che rende difficile visualizzare piccole quantità di DNA .
Pulse -Field

Questa forma di elettroforesi viene utilizzata per separare grandi molecole di DNA ed è spesso usato per la genotipizzazione . Grandi frammenti di DNA migrano ad un tasso simile . Può essere difficile, quindi , per risolvere diverse bande . Elettroforesi Pulse campo alterna il campo elettrico . Questo permette una maggiore separazione e la risoluzione del DNA .
Capillare

elettroforesi capillare è un metodo rapido e sensibile per la separazione del DNA . Piccole quantità di DNA possono essere risolti . Il DNA può essere visualizzato con marcatura fluorescente o usando la luce UV .
Denaturazione

La separazione del DNA può essere complicata dalla sua struttura . E 'possibile utilizzare urea e formammide distruggere la struttura per abbassare il punto di fusione del DNA . Questo può essere usato sia in gel di agarosio e poliacrilammide .

Considerazioni

Il metodo di elettroforesi selezionato dipenderà dalle dimensioni dei frammenti di DNA da separare . Come il DNA sarà utilizzato dopo la separazione determinerà anche il metodo di finale.