Salute e malattia
piastre Biologia molecolare e batteriologia uso di agar a microrganismi cultura come i batteri per la sperimentazione . L' agar è l'agente che solidifica , o gel , un mezzo nutriente liquido necessario dal microrganismo di sopravvivere e crescere . Una volta trasferiti ad una piastra di agar , i batteri crescono in colonie distinte ( se coltivato a basse concentrazioni ) o strisci ( se coltivate ad alte concentrazioni ) e può essere raccolto per l'analisi. I biologi preparare piastre di agar , come il processo richiede l'accesso ai reagenti di laboratorio -grade e macchine e una buona comprensione della biologia molecolare e delle tecniche sterili . Cose che ti serviranno
Indossare attrezzatura di protezione , compresi i guanti , un camice e una maschera viso, e decontaminare tutte le superfici . Lavorare accanto a un becco Bunsen o , preferibilmente , in una cappa a flusso laminare sterile . Questo impedisce inquinanti nell'aria al di cadere nella agar .
2
Rimuovere la pila di piatti petri dalla confezione ma salva per il reimballaggio le piastre di agar . Etichetta la superficie esterna del piatto ( non il coperchio) con il tipo di agar e la data di preparazione . Disporre i piatti come un unico strato con i coperchi rimossi per rendere colata del agar facile .
3
Mescolare il bacto - tryptone , estratto di lievito e agarosio insieme e poi aggiungere l'idrossido di sodio soluzione ( NaOH ) . Aggiungere acqua distillata sterile per ottenere 1L di terreni di coltura . Trasferire questa soluzione in una bottiglia di vetro con almeno il volume 1.5L . Liberamente avvitare il coperchio della bottiglia ed etichetta la data di preparazione e il nome del supporto . Mettere una striscia di nastro autoclave sul flacone e sterilizzare in autoclave per 25 minuti. Lasciate la bottiglia fredda per non inferiore a 45 gradi Celsius ( o si indurisce prematuramente ), ma non superiore a 50 gradi Celsius . È possibile memorizzare bottiglie di raffreddata e solidificata agar a 4 gradi Celsius e poi caldo fino liquefatto . Se necessario per la vostra particolare esperimento o ceppo di batteri , aggiungere il tipo e la quantità di supplemento appropriato come gli antibiotici . Se il supporto è troppo caldo , i supplementi saranno distrutti , in modo da controllare attentamente la temperatura del supporto prima di procedere .
4
Versare un volume sufficiente di agar per riempire a metà il piatto , mentre l'agar è ancora caldo e liquefatto . Assicurarsi che la superficie sia completamente ricoperta . Non versare una quantità eccessiva o farla agar raggiungere la parte superiore del piatto . Conservare le piastre in un ambiente sterile , consentendo il becco Bunsen o cappa a flusso laminare per funzionare continuamente . Lasciare le piastre per impostare e poi sostituire i coperchi .
5
asciugare le piastre di agar per circa 30 minuti a un'ora in forno non superiore a 37 gradi Celsius . In alternativa , è possibile lasciare la cappa a flusso laminare per tre minuti o su un banco di laboratorio decontaminato in una zona a traffico limitato , che non è malmessa per un giorno o due . Asciugatura le piastre si ferma qualsiasi soluzione batterica posizionati sulla superficie di agar dalla semplice diluizione fuori e scivolare , invece di formare colonie che si attaccano al agar .
6
Conservare con cura le piastre al buio a 4 gradi Celsius . Stack le piastre di agar secchi con il loro fondo per consentire di vedere chiaramente le etichette e per prevenire microrganismi e detriti cadano sulla superficie agar e contaminazione . Mettere i piatti indietro nel loro imballaggio , coprire con un foglio di alluminio e nastro confezione chiusa . Etichettare i piatti confezionati con il loro contenuto e la data di preparazione . È possibile memorizzare le piastre per un massimo di due mesi e dovrebbe scartare dopo.
ricerca medica