Che è un microscopio confocale Usato per

? Microscopio ottico ordinario non può essere usato per osservare un tessuto tridimensionale senza sezionare fisicamente il campione . Microscopia confocale a scansione , tuttavia , è un metodo alternativo di osservazione che fornisce un modo più diretto di vedere l'architettura tridimensionale di un complesso esemplare non sezionato . Metodi di imaging elettronici permettono all'utente di concentrarsi su uno stesso piano in una spessa esemplare , respingendo la luce che viene dall'alto e sotto il piano di messa a fuoco. Perché Confocal Microscopy ?

Microscopio confocale a scansione è utilizzato dai ricercatori in scienze biologiche e altre industrie per ottenere un'immagine dell'architettura tridimensionale di un campione , ad esempio una cellula o tessuto . Inoltre , la procedura viene utilizzata per osservare la struttura microscopica di un campione che per qualche motivo non può essere tagliata in sezioni anticipo . Anche se queste sfide possono essere soddisfatte mediante un complesso programma di elaborazione di immagini basato su computer , questo metodo è lento e richiede una grande quantità di potenza di calcolo .
Microscopia confocale vs microscopia ottica standard

Se un campione di spessore viene visto con un microscopio ottico convenzionale, l'immagine ottenuta concentrandosi su qualsiasi piano specifico è aggravata dal sfocate , letture out - of-focus che provengono dalle parti del campione disteso sopra e sotto il piano di messa a fuoco . Per la microscopia ottica ordinaria per lavorare bene , un campione deve essere tagliata in sezioni sottili da analizzare , e lo spessore della sezione è inversamente proporzionale alla chiarezza dell'immagine . Tuttavia , forse preziose informazioni sulla terza dimensione si perde quando un campione viene sezionato e , come detto, alcuni campioni non possono essere sezionati facilmente a tutti.
Come Funziona

Il microscopio confocale a scansione si concentra su un piano specifico in un campione di spessore , respingendo la luce che proviene da out-of -focus regioni al di sopra e di sotto di tale piano . Ciò si traduce in un ambiente pulito " sezione ottica ", e da una sequenza di queste sezioni prese a diverse profondità , un programma per elaboratore può ricostruire una immagine tridimensionale . Questa strategia è abbastanza simile a quello che uno scanner CAT fa per radiologi inquirenti un intero corpo umano , in quanto entrambi i metodi attuali di vista pulite sezione di interni di una struttura intatta
Come funziona : I Dettagli
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il dispositivo è generalmente utilizzato con ottica fluorescenza , e in ogni istante sistema ottico della macchina concentra i riflettori su un unico punto ad una certa profondità nel campione . È necessaria una fonte estremamente luminoso di illuminazione puntuale , e questo è di solito fornito da un laser la cui luce viene fatto passare attraverso un foro stenopeico . Un rivelatore dotato di un'apertura pinhole raccoglie la fluorescenza emessa dal campione illuminato . Solo la luce dal punto di focus specifico entra nel rivelatore , e le esclude dispositivo luce proveniente da aree al di fuori del piano di messa a fuoco.
Usi specifici

La scansione confocale microscopio viene spesso utilizzato per risolvere la struttura di vari oggetti tridimensionali complesse , quali le reti di fibre del citoscheletro nel citoplasma delle cellule , e le modalità di cromosomi e geni in una cella del nucleo durante diverse fasi del ciclo di divisione cellulare . Granuli di polline , per esempio , hanno una parete complesso di celle scolpita , che può essere visto solo chiaramente usando la microscopia confocale . L'industria elettronica utilizza anche questa macchina e la metodologia per ispezionare semiconduttori .