Qual è lo scopo di Acido veloce colorazione ?

In microbiologia , macchiando un batterio significa colorarlo con un colorante di vedere più chiaramente sotto un microscopio . Se i batteri non sono macchiati , appaiono limpida e incolore , ed è difficile vedere le loro forme . A parte le loro forme , come facilmente un batterio è tinto da alcune macchie - se non del tutto - spesso fornisce un indizio per identificare i batteri . Colorazione acido -veloce è un tipo di colorazione che è efficace su alcuni batteri che non possono essere macchiati con altri metodi . La colorazione differenziale

Per macchiare un normale batterio , macchia liquido viene applicato alla slitta per circa un minuto , poi risciacquato con acqua . Colorazione differenziale utilizza le macchie diverse per due batteri diversi nella stessa diapositiva . Ad esempio , in una colorazione di Gram , il vetrino viene prima trattata con violetto cristallo e iodio , poi decolorati con alcool . Cellule che sono Gram -positivi manterranno il colore viola scuro della prima macchia anche dopo viene utilizzato l'alcol , mentre le cellule Gram- negativi torneranno ad incolore . Quindi viene applicata una seconda macchia , in un colore contrastante come il rosa , e le cellule Gram- negativi girerà rosa mentre le cellule Gram- positive terranno la loro colorazione originale .
Storia

Alcuni batteri hanno pareti cellulari spesse costituite da lipidi , i mattoni di grassi , che li rende cerosa e quasi impermeabile. Ciò significa una macchia normale non può penetrare nella cellula . Nel 1880 , gli scienziati stavano cercando di studiare Mycobacterium tuberculosis , il batterio che causa la tubercolosi . Tuttavia, non disponendo di una colorazione di Gram regolare se non è stata immersa nella macchia fino a 24 ore. Paul Ehrlich , che in seguito ha sviluppato il primo farmaco efficace contro la sifilide , sviluppato colorazione acido -veloce per forzare la macchia nei batteri. Il metodo di Ehrlich sono voluti solo 45 minuti , mentre la moderna tecnica di colorazione acido-resistente dura solo 5 minuti.
Metodo

Per forzare il colorante , solitamente carbol - fucsina , nei batteri , deve essere riscaldato per un bicchiere di acqua bollente per 5 minuti , mentre la slitta è costantemente invaso da macchia e non lasciata asciugare . Un metodo alternativo per riscaldare consiste nell'utilizzare modificato macchia fucsina Kinyoun carbol , che non deve essere riscaldata , ma è imperativo che il vetrino non si secchi durante i 5 minuti di immersione nella macchia . Qualunque sia il metodo utilizzato colorazione principale , la diapositiva viene decolora con alcool acido - alcool non regolari - e tinto con un contrasto secondario di un colore diverso per mostrare gli altri batteri che possono essere presenti . Batteri cui macchie primario rimane dopo decolorante con alcool acido sono chiamati acid -fast .
Organismo precauzione

Mycobacterium tuberculosis è estremamente pericoloso , e viene esaminato solo in ospedali e cliniche strutture che hanno camere separate o cappucci di trasferimento appositamente progettati per prevenire la contaminazione . E ' illegale usare in un laboratorio accademico . Invece , viene utilizzato Mycobacterium smegmatis , ma ha una parete cellulare molto più sottile di M. tuberculosis , quindi è più facile accidentalmente over- decolorare il vetrino e rimuovere la macchia principale .
Procedurale precauzione
fumi

Carbol - fucsina sono tossici , così quando il riscaldamento di loro , usa una cappa aspirante per contenere i fumi e di ventilazione al di fuori . Inoltre, per evitare i pericoli di diapositive riscaldamento complessivamente , Kinyoun carbolfucsina può essere usato al posto , che ha una maggiore concentrazione di fenolo e fucsina , due ingredienti attivi nella macchia , e non ha bisogno di essere riscaldato a penetrare i batteri .